Цель исследования – диагностика потенциально чрезвычайно опасных, угрожающих жизни опухолей уринарного тракта высокой степени злокачественности (HGUC). Цитологическое исследование введено в мировую медицинскую практику в 1945 году Дж. Папаниколау.
Уринарный тракт – это анатомические структуры, выполняющие функцию мочевыделения. Он состоит из почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря и уретры. Переходный эпителий или уротелий, покрывающий уринарный тракт при определённых обстоятельствах становится источником новообразований, которые весьма разнообразны, как по морфологическому строению, так и по степени злокачественности. Первичные злокачественные опухоли почечной лоханки и мочеточника составляют всего 5-6% от всех опухолей уротелия, так что, основная доля угрожающей жизни патологии приходится на опухоли мочевого пузыря (МЗ РБ ГУ РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова. «Алгоритмы диагностики и лечения злокачественных новообразований», 2012).
Ежегодно в РБ выявляют 1000-1200 новых случаев рака мочевого пузыря на различных стадиях развития. Страдает преимущественно мужское население. В Европейских странах, в структуре общей онкологической заболеваемости, рак мочевого пузыря занимает 4-е место у мужчин и 14-е – у женщин. В подавляющем числе случаев – это уротелиальная карцинома высокой степени злокачественности (HGUC), которая проявляет себя клинически гематурией, т.е. появлением крови в моче. За последние 20 лет в нашей стране заболеваемость выросла почти в 2 раза. Относительно высокий показатель отношения смертности к заболеваемости, который составляет 0.33, означает, что каждый третий пациент погибает, а это, без сомнений, свидетельствует об отсутствии эффективных неинвазивных методов ранней диагностики.
В последние годы учёные рассматривают возможность вирусной природы
рака мочевого пузыря. Полиомавирус человека 1
, более известный, как полиома-
BK-вирус
, уже многие годы притягивает к себе внимание исследователей в данной области, как потенциально опасный фактор развития неопластических процессов мочевыводящей системы. Этот вирус широко распространён среди всей популяции человека. Можно сказать, что им инфицировано до 90% взрослого населения нашей планеты. Впервые, штамм человеческого полиомавируса был выделен из мочи ещё в 1971 году. В названии этого штамма заглавные латинские буквы BK соответствуют инициалам того пациента, у которого его обнаружили. И за последние два десятилетия, наши представления о роли этого вируса серьёзно эволюционировали. Неоспоримым является тот факт, что при снижении иммунологической защиты, а именно при проведении цитостатической терапии у пациентов с аллографт трансплантацией почек, полиома-BK-вирус является основной причиной BKV аллографт нефропатии, уретрального стеноза и геморрагического цистита (Drachenberg CB, Hirsch HH, Ramos E, Papadimitriou JC (2005). Hum. Pathol. 36: 1245-1255).
Вирус проникает в организм человека через верхние дыхательные пути и долгое время бессимптомно персистирует преимущественно в уротелии, а также в костном мозге, вызывая латентное инфицирование. Здоровая иммунная система контролирует бессимптомное пребывание вируса в организме человека. Однако, при нарушеннии иммунного надзора, возникающего по тем или иным причинам, вследствие угнетения функции иммунитета, происходит активация BKV-вируса. А морфологическим отражением перехода из латентного состояния в активное, является появление специфических клеток. В уротелиальном эпителии вирусные частицы образуют внутриядерные включения, в результате чего, клетка приобретает очень характерные морфологические черты. Первое описание таких клеток с включениями вирусных частиц дал доктор Koss LG 40 лет назад, обнаружив их в моче пациента после проведенной трансплантации почки. Он назвал их Decoy-клетки. Они могут быть 4-х типов и до последнего времени, среди цитопатологов доминируют представления, что эти инфицированные клетки нельзя относить к злокачественным. Но их появление в моче пациента с аллографт трансплантацией, является самым ранним признаком угрозы BKV аллографт нефропатии. На данных рисунках представлены 4 морфологических типа Decoy-клеток.
Иными словами, Decoy- клетки – самые ранние предвестники отторжения трансплантата. Но только с внедрением в практику жидкостных технологий приготовления препарата из свежевыпущенной мочи или из смыва мочевого пузыря, с окраской по Папаниколау, стало возможным обнаруживать эти клетки, и с высокой чувствительностью и специфичностью отличать их от злокачественных. В настоящее время обнаружение
Decoy-клеток в моче является скрининговым тестом BKV нефропатии.
Кроме того, у пациентов, перенесших трансплантацию почки, наряду с Decoy-клетками, часто обнаруживают клетки уротелия, с признаками выраженной клеточной атипии, соответствующими цитоморфологическим характеристикам уротелиальной карциномы высокой степени злокачественности, а также клетки, которые несут в себе одновременно черты, присущие и Decoy-клеткам, и клеткам HGUC. Эти клетки не только имеют смешанные черты Decoy-клеток и злокачественных, но и несут в себе протеины (SV-40 T) полиома-BK-вируса (Galed-Placed I, Valbuena-Ruvira L. Diagn Cytopathol.2011 Dec;39(12):933-7). Многие из клинических случаев, описанных в литературе, свидетельствуют о возможной онкогенной роли полиома-BK-вируса в возникновении уротелиальной карциномы (Hassan S, Alirhayim Z, Ahmed S, Amer S. Case Rep Nephrol.2013; 2013:858139). Протеины BKV оказывают повреждающее действие на синтез белков-супрессоров опухолевого роста (р53), что приводит к нарушению процесcов восстановления ДНК. Этот патогенетический механизм лежит в основе возникновения генетически нестабильных изменений, приводящих к трансформации нормального уротелия сначала в диспластичный, а затем в уротелиальную карциному высокой степени злокачественности (HGUC). HGUC характеризуется высокой частотой рецидивов и прогрессии до мышечно-инвазивных стадий Т2,Т3,Т4 с метастазами в лимфатические узлы. в 95% случаев всех смертельных исходов от рака мочевого пузыря устанавливают диагноз HGUC.
Итак, достоинства цитологического исследования уротелиального тракта:
Предпочтительной технологией приготовления цитологического препарата мочи является жидкостная осаждением (BD SurePath), которую мы используем в нашей лаборатории. Тонкослойные мазки позволяют проводить дальнейшую диагностику с использованием всего арсенала молекулярно-генетических методов (иммуноцитохимия, FISH, и т.д.).
Цитологический диагноз HGUC объединяет в себе все генетически нестабильные злокачественные опухоли уротелия, гистологически весьма разнообразные. С целью оптимизации подходов к интерпретации уринарной цитопатологии и стандартизации критериев диагностики, на международном конгрессе в Париже, в 2013 году была принята новая цитологическая система классификации. Она во многом напоминает систему Bethesda для цитологического анализа патологии щитовидной железы и цервикального канала.
| Категории | Парижская система оценки цитологии уринарного тракта | Вероятность злокачественной опухоли |
|---|---|---|
| I | Неудовлетворительный/недиагностический материал | 0-10% |
| II | Негативная по уротелиальной карциноме высокой степени злокачественности (NHGUC) | 0-10% |
| III | Атипическая уротелиальная клетка (AUC) | 8-35% |
| IV | Подозрение на уротелиальный рак высокой степени злокачественности (SHGUC) | 50-90% |
| V | Уротелиальная карцинома низкой степени злокачественности (LGUC) | ~10% |
| VI | Уротелиальная карцинома высокой степени злокачественности (HGUC) | >90% |
| VII | Другие опухоли, первичные и вторичные | >90% |
Итак, цитологическое исследование мочи с применением жидкостных технологий приготовления мазка и использованием диагностических критериев Парижской классификации 2014 года, является основным неинвазивным методом диагностики и мониторирования уротелиальной карциномы высокой степени злокачественности.
При возникновении затруднений в использовании кольпоцитологического метода (в момент кровотечений, при воспалительном процессе во влагалище и , а также у девственниц) функциональное состояние половой системы можно изучать у женщин путем цитологического исследования осадка мочи (уроцитограмма).
Цитологическое исследование осадка мочи впервые было произведено в урологической практике для выявления рака мочевыводящих путей. В дальнейшем этим методом стали пользоваться для установления гормональных сдвигов в менструальном цикле, так как было обнаружено, что клеточные элементы осадка мочи претерпевают аналогично влагалищному эпителию циклические изменения.
Циклические изменения количества и качества клеток осадка мочи связаны с функциональным состоянием женской половой системы. Взаимосвязь между реакцией влагалищного эпителия и клеточным составом мочи и уровнем содержания половых стероидных гормонов в женском организме объясняется их эмбриологической общностью. Многослойный плоский эпителий влагалища, эпителий треугольника Льето мочевого пузыря и эпителий уретры образуются из урогенитального синуса.
Методика . Для цитологического исследования осадка мочи лучше пользоваться первой порцией утренней мочи, в которой содержится наибольшее количество клеточных элементов. Наряду с этим можно использовать и мочу, полученную в другое время суток. Если необходимо сохранить мочу дольше 12 ч, то во избежание дегенеративных изменений в клеточных элементах в нее добавляют 1/3 объема 95% спирта.
Методы приготовления мазка осадка мочи. 1. Мочу фильтруют через кусочек ваты, помещенный в стеклянную воронку. Осевшими на вату элементами делают мазок на предметном стекле после предварительного нанесения на него тонкого слоя яичного белка. Мазок фиксируют медленно в смеси 95% спирта пополам с эфиром в течение 2 мин. Предметное стекло с мазком может оставаться в фиксирующем растворе в течение многих дней.
2,50 мл мочи центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 2000 об/мин. Осадок мочи насасывают пипеткой, 1-2 капли осадка помещают на предметное стекло и фиксируют описанным выше способом. Окраску производят одним из способов, применяемых при цитологическом исследовании влагалищного мазка (см. выше); наиболее целесообразно пользоваться полихромным методом окраски.
В осадке нормальной мочи обнаруживается пять типов клеток: базальные, промежуточные, ороговевающие (базофильные), ороговевшие (ацидофильные) и безъядерные ацидофильные элементы.
Количество безъядерных клеток
в осадке мочи здоровых женщин детородного возраста колеблется в пределах 2-20% и в большей степени связано с выделением надпочечниковых стероидов, чем гормонов, вырабатываемых в яичнике. Высказывается предположение, что индекс содержания без ядерных клеток дает возможность судить о функции надпочечников при изменении функции яичников.
После общей оценки мазка
производят подсчет 100 или 200 клеток и высчитывают индекс.
Динамика содержания в клеточном осадке мочи различных клеток многослойного плоского эпителия в соответствии с фазами менструального цикла приведена на рис. 29. Установлено, что соотношение между различными типами клеточных элементов определяется соотношением половых стероидных гормонов в организме.
По наблюдениям А. Т. Бунина, Momoli и соавт. и др., у здоровых женщин с нормальными менструациями в возрасте 20-30 лет изменения эозинофильного индекса и КПИ в мазках осадка мочи и влагалищных мазках происходят параллельно. В мазках осадка мочи имеются лишь незначительные отличия в диаметре и степени окраски поверхностных клеточных элементов. Высказывается предположение, что диагностическая ценность обоих типов мазков одинакова.
Уроцитограмма
является ценным вспомогательным методом функциональной диагностики яичников.
Лабораторное цитологическое исследование проводят, чтобы диагностировать онкологические заболевания мочеполовой сферы. Также врач может назначить данный метод исследования если в моче пациента были обнаружены частички крови. Рассмотрим более подробно как проводится анализ мочи на цитологию, и о чем говорят результаты.
Анализ на цитологию мочи проводится в лабораторных условиях под микроскопом, и делается это для выявления раковых клеток. Этот метод проводит оценку микрофлоры человека и позволяет выявлять не только опухолевые поражения, но и патологические изменения без новообразований. Цитологический тест, чаще всего назначается тем больным, у которых обнаружена опухоль мочевыводящих путей.
Несмотря на то, что с помощью этого анализа могут быть обнаружены раковые клетки в почках, предстательной железе, анализ мочи на цитологию чаще всего проводят при диагностировании мочевого пузыря. В этом случае анализ позволяет выявить злокачественную опухоль, которая поразила организм человека.
Проводя цитологическое исследование и дополнительные тесты и процедуры, можно обнаружить раковые клетки мочевыводящих путей и патологию таких органов:
Цитологическое исследование делается, когда опухоль уже имеется, оно также может показать ранние стадии ракового заболевания, и опухоли, которые считаются доброкачественными. Доктор в обязательном порядке назначает проведение анализа, как только в моче пациента обнаруживаются частички крови.
Кроме этого, цитологию делают тем больным, кто находится на завершающей стадии лечения заболевания. Это позволяет исключить рецидив болезни и проконтролировать ход лечения.
Любой анализ мочи, как правило, имеет одинаковые правила подготовки. Это прежде всего соблюдение личной гигиены, использование стерильной посуды для сбора биоматериала. Единственное что может отличаться, это время сбора и количество собираемого материала.
Урину для цитологического анализа собирают утром, после того как был опорожнен мочевой пузырь жидкостью, собранной за ночь. Если вы встали утром в 7 часов, стоит сразу сходить в туалет и опорожниться.
Затем следующий материал, примерное через 1,5 – 2 часа собирают для анализа. Не стоить пить много жидкости, так как оно способна разбавить урину. Желательно сразу отнести в лабораторию материал, тогда точность и информативность анализа будет сто процентной. Посуду для урины желательно приобрести в аптеке, там она стерильная и не требует дополнительных обработок.
Если материал для анализа требуется необходимо взять у тяжелобольных или лежачих людей, то в этом случае используется катетер. Необходимо провести гигиену больному – промыть промежности, вытереть сухим полотенцем, вставить катетер и собрать биоматериал.
Часто врач назначает проведение нескольких таких процедур, для более точного диагноза и установление факта онкологии. Собранный материал исследуется в лабораторных условиях, время проведение анализа от 3 до 5 дней.
Цитологическое исследование мочи, или анализ урины на атипичные клетки, представляет собой изучение структуры элементов этой биологической жидкости под микроскопом. Оценка материала проводится для установления наличия или отсутствия в клетках признаков злокачественного перерождения и других патологических процессов. Метод позволяет вовремя обнаружить или контролировать заболевания органов мочевыделительной системы.
Моча на цитологию сдается при таких состояниях:
Цитология осадка урины не может диагностировать такие доброкачественные опухоли мочевого пузыря, как липому, фиброму, лейомиому, нейрофиброматоз, а также патологическое разрастание тканей – эндометриоз. Однако метод позволяет вовремя выявить папилломы, предупредив их перерождение, а также обнаружить раковые клетки.
Исследование не требует специальной подготовки. Перед процедурой желательно провести гигиену половых органов, а затем собрать урину в стерильный контейнер, герметично закрывающийся крышкой.
Доставить образец в лабораторию желательно в течение двух часов.
Время забора жидкости зависит от направления исследования:
Этот метод проводит оценку микрофлоры человека Диагностика новообразований мочевыводящих путей основана на слущивании клеток этих опухолей и попадании их в урину:
В лаборатории из осадка материала готовят нативные (неизмененные) и окрашенные специальными способами мазки. Затем под микроскопом изучают морфологический состав клеток. Кроме наличия доброкачественной или злокачественной опухоли, цитологический анализ помогает обнаружить другие поражения мочевыводящих путей, например, воспалительный процесс.
Кроме этого, цитологию делают тем больным, кто находится на завершающей стадии лечения заболевания Результаты исследования на атипичные клетки могут быть такими:
Чувствительность метода составляет около 90%. Однако исследование может иметь погрешности, на это влияют инфекционные поражения мочевыводящих путей, недостаточное количество клеток, камни в мочевом пузыре или почках, внутрипузырные инстилляции (вливание медикаментов). Если анализ окажется положительным, для подтверждения диагноза прибегают к цистоскопии – биопсии (отщипыванию) тканей мочевого пузыря с последующим микроскопическим исследованием.
Преимущество данного анализа в том, что цитологический тест по сравнению с другими исследованиями не требует много времени В этом случае также изучают нативные и окрашенные мазки, а затем подсчитывают количество в них клеток разных типов, среди которых:
Особое внимание уделяют последним – число этих элементов в разные дни цикла составляет 2-20% и указывает на выделение гормонов надпочечников (больше, чем яичников).
Микроскопия осадка мочи входит в состав общего анализа урины и может выявить и другие патологии. Например, при уровне лейкоцитов выше нормы говорят о воспалительном процессе, а обнаружение бактерий или грибков свидетельствует об инфекциях мочеполовых путей.
Цитологический анализ осадка мочи - это диагностический метод для определения заболеваний мочеполовой системы , который позволяет выявить наличие воспалительных и онкологических процессов на ранних стадиях.
Назначается данное исследование врачом при подозрении развития у пациента раковой опухоли мочевых путей , а так же используется как способ контроля за лечением раковых заболеваний.
| Сроки выполнения | 3-5дней |
| Синонимы (rus) | Микроскопия мочевого осадка |
| Методы | Фильтрация мочи, центрифугирование |
| Единицы измерения | шт. |
| Подготовка к исследованию | соблюдение гигиены мочеполовой системы |
| Исследование первой порции мочи | |
| Использование стерильной емкости, не обработанной химическими моющими средствами | |
| Тип биоматериала и способы его взятия | Моча |
Впервые подобное диагностирование было проведено для диагностики рака мочепроводящих путей . А затем метод стал использоваться для определения сдвигов гормонального фона в менструальном периоде, в результате чего удалось обнаружить, что содержание клеток в осадке мочи изменяются циклично, как и влагалищный эпителий.
Подобные колебания в количестве и качестве клеточного материала осадка мочи объясняются функциональными особенностями работы женской половой системы. При этом формирование многослойного плоского эпителиальной ткани влагалища, эпителиальной ткани в треугольнике Льето мочевого пузыря и эпителия уретры в период эмбриологического развития происходит из одного урогенитального синуса, чем и объясняется их взаимосвязь.
Методика диагностики предполагает использование первых порций мочевых выделений с утра, которая содержит наибольшее число элементов клеток. Возможен и более поздний сбор материала и даже его хранение, но качество анализа при этом, все-таки, снижается.Моча собирается в чистую, желательно стерильную емкость,которую не очищали средствами бытовой химии. Полученный материал фильтруют, используя ватный фильтр, уложенный в воронку. Осадком на вате делается мазок на предметное стекло поверх небольшого слоя белка куриного яйца, нанесенного заранее. Закрепляют с помощью 95% процентного спирта и эфира в пропорции 1:1 - 2 минуты. Затем окрашивают по Романовскому и подсчитывают число клеток.
Второй метод предполагает отбор 50 мл мочи, который 10 минут центрифугируют, образовавшийся на дне пробирки слой с помощью пипетки капают на предметное стекло и вновь закрепляют смесью эфира и спирта, затем производится окраска, чаще всего, полихромным методом и подсчет 100 или 200 клеточных элементов, затем высчитывается индекс.
В норме в моче должны содержаться пять типов клеток:
Как показывают исследования, у здоровой женщины в 20-30 лет эозинофильный индекс и кариопикнотического индекса мазка из осадка мочи и мазка влагалища изменяются в равных пропорциях. Соответственно, диагностическая эффективность обоих мазков равнозначна. Поэтому цитологический метод нередко назначают при невозможности взять мазок из влагалища. Он позволяет поставить диагноз на ранних стадиях, хотя результат исследования не 100% говорит о наличии раковой опухоли .
