Blog despre un stil de viață sănătos.  Hernie spinală.  Osteocondroza.  Calitatea vieții.  frumusete si sanatate

Blog despre un stil de viață sănătos. Hernie spinală. Osteocondroza. Calitatea vieții. frumusete si sanatate

» Embryo 8 si cu eco ce inseamna. Consultații cu specialiști. Transferul unui embrion la organul reproducător

Embryo 8 si cu eco ce inseamna. Consultații cu specialiști. Transferul unui embrion la organul reproducător

Lucrul cu celule microscopice este extrem de dificil. Pentru a face acest lucru, trebuie să aveți un grad ridicat de profesionalism și echipamente scumpe de înaltă tehnologie.

Doar un specialist cu suficientă experiență practică poate evalua viabilitatea embrionilor și poate lua o decizie privind transferul de embrioni.

Dezvoltarea embrionară este un proces complex. Ovulul fecundat se divide, ajungând în stadiul de blastocist în a 5-a zi de dezvoltare. Dacă înainte de această etapă embrionul era o masă celulară, atunci blastocistul dobândește o structură organizată: un trofoblast (stratul exterior), a cărui sarcină este de a „prinde” epiteliul endometrial din uter și apoi de a participa la formarea placenta si embrioblast (nodul germinal intern).

Dacă, dintre toți embrionii utilizați în programul FIV, cel puțin 40% ajung la stadiul de blastocist de înaltă calitate, atunci stadiul embrionar este considerat reușit, iar procedura are șanse mari de finalizare cu succes.

Nu se folosesc mai mult de 2 blastociste pentru transferul de embrioni; embrionii sănătoși rămași pot fi crioconservați. Dacă prima încercare de inseminare artificială nu reușește, atunci se poate folosi material vitrificat, a cărui calitate nu suferă de îngheț și dezgheț, iar femeia va evita o etapă atât de dificilă a FIV precum stimularea hormonală.

Fiecare etapă a dezvoltării embrionului are propriul său sistem de evaluare a calității și mod de înregistrare a acestei evaluări. Și pentru a înțelege denumiri precum „8c”, trebuie să înțelegeți cel puțin puțin despre conținutul acestor etape și termenii aferenti.

Prima zi

În prima etapă, embriologul evaluează semnele de fertilizare după procedura FIV, ICSI, IMSI sau PICSI. În această etapă se evaluează prezența, numărul, simetria, structura internă și aspectul pronucleilor în embrion.

Pronucleii sunt nucleele celulelor germinale masculine și feminine care nu s-au unit încă și poartă un singur set de cromozomi. Pe baza numărului și aspectului lor, se evaluează viabilitatea embrionului și perspectivele de apariție a patologiilor.

În mod normal, ar trebui să fie două, ar trebui să aibă dimensiuni relativ egale, să fie în apropiere și să aibă „nucleoli” în interior - pronucleoli, de asemenea, într-o anumită cantitate și localizați într-un anumit fel.

În acest stadiu, multe patologii se pot forma, de exemplu, în prezența unui singur pronucleu, fertilizarea nu poate avea loc, deoarece această formațiune este purtătoarea materialului genetic și încă nu am învățat să ne reproducem fără participarea sex opus.

Pot exista trei pronuclei. Astfel de embrioni poartă adesea un set anormal, triplu de cromozomi și nu sunt viabili. De obicei mor înainte de implantare (atașarea de peretele uterului) sau duc la un avort pierdut. Astfel de embrioni sunt aruncați și nu sunt utilizați în programele de FIV.

A doua zi

A doua zi este marcată de unirea nucleelor ​​gameților feminin și masculin, precum și de procesul de fragmentare a zigotului, care în acest stadiu devine embrion. Numărul de blastomere (celule embrionare) este de 2-4, dar volumul lor nu crește.

Fragmentarea embrionilor este evaluată de un specialist în funcție de următoarele criterii:

  • numărul de celule embrionare;
  • forma, structura, dimensiunile;
  • simetria diviziunii;
  • viteza de zdrobire;
  • numărul de nuclee din blastomere. În mod normal, blastomerele sunt mononucleate, în patologii apare multinuclearea (mai mult de un nucleu), ceea ce indică cel mai probabil o tulburare cromozomială la nivelul embrionului;
  • anomalii ale citoplasmei (conținutul celulelor);
  • prezența unor zone de citoplasmă care nu au nuclei (fragmentare). Cu cât este mai mare gradul de fragmentare, cu atât este mai mare riscul ca embrionul să se dezvolte în continuare. Astăzi, nu este complet clar de ce apare fragmentarea, care apare destul de des în programele de FIV: este o consecință a stimulării sau este o trăsătură caracteristică dezvoltării embrionare.

Embrionii cu o formă regulată de blastomer, absența fragmentării și rata normală de diviziune au capacitatea maximă de implantare.

Nivelul de fragmentare și numărul de blastomere sunt clasificate după tip, după cum urmează:

  • A – embrion de înaltă calitate fără blastomeri fragmentați;
  • B – embrion de calitate medie, fragmentarea este mai mică de 20%;
  • C – calitate satisfăcătoare a embrionului, fragmentarea este de 21–50%.

Embrionul de cea mai bună calitate este 4A, unde 4 este numărul de blastomere, A este absența fragmentării.

Ziua trei

Continuă fragmentarea embrionului, care are de la 4 până la 9 blastomeri. La începutul celei de-a treia zile de dezvoltare este lansat propriul program genetic, care în unele cazuri conține „greșeli de tipar”. Înainte de aceasta, embrionul „folosește” pentru creșterea sa substanțele acumulate de ou în timpul maturizării sale.

Dacă un embrion are mutații în program („bloc de dezvoltare”), atunci nu se dezvoltă în continuare. Acest lucru se întâmplă în aproximativ 20% din cazuri. Cauza „blocului de dezvoltare” poate fi lichidul seminal de calitate scăzută sau oul. Dezvoltarea inițială nesatisfăcătoare a embrionului indică probleme cu ovulul; dacă embrionul „sufă” din a treia zi de cultură, atunci spermatozoizii erau de proastă calitate.

„Blocul de dezvoltare” este așa-numita selecție naturală, un mecanism de salvare evolutiv care oprește dezvoltarea embrionilor de calitate scăzută. Modul în care se va dezvolta și crește embrionul în viitor depinde de genomul format și de oportunitatea începerii funcționării acestuia.

Ziua a patra

Până în acest moment, embrionul conține până la opt blastomeri. Celulele contactează mult mai activ, suprafața embrionului este ușor netezită. A treia zi de cultivare a embrionilor este caracterizată de începutul unui proces precum compactarea, când limitele celulelor embrionare nu pot fi distinse. Compactarea poate fi parțială sau completă. Dacă acest proces a avut loc în a doua zi, atunci poate că embrionul se dezvoltă incorect, cu abateri, ceea ce se reflectă în protocolul embriologic. Se pregătește tranziția embrionului într-un blastocist.

Morula (embrionul de trei zile) conține până la 16 blastomeri. În timpul concepției naturale în acest moment, embrionul este transportat de la trompele uterine la uter. La sfârșitul celei de-a patra zile, cavitația apare atunci când se formează un gol în interiorul embrionului.

În timpul creșterii embrionare, un anumit număr de celule ies din membrana embrionară. Dacă este necesară cercetarea genetică, aceste celule sunt luate pentru analiză.

Diagnosticul este efectuat de un embriolog în zilele 5-6 prin străpungerea membranei embrionare. Biopsia este absolut sigură pentru embrion și nu dăunează dezvoltării acestuia. Până la obținerea datelor de diagnostic, embrionii sunt crioconservați.

Rezultatele studiului vor afecta direct „soarta” ulterioară a embrionului, ale cărui caracteristici nu se schimbă în niciun fel după dezghețare. Tehnologiile moderne sigure pentru congelarea biomaterialului au făcut posibilă introducerea pe scară largă a diagnosticului genetic în diferite programe ART.

În a patra zi, evaluarea embrionului nu este foarte informativă, dar poate fi apreciată prin numărul de celule compactate. Cu cât mai multe astfel de celule, cu atât este mai probabil ca embrionul să devină un blastocist.

Compactarea este evaluată pe clasă:

  • mai întâi – mai puțin de 50% din celule sunt compactate;
  • al doilea – aproximativ 50%;
  • a treia – 75%;
  • al patrulea – 100%.

Nu toate laboratoarele evaluează acest criteriu.

Ziua cinci

În această etapă, care include perioada de la sfârșitul zilei a patra până la începutul celei de-a șasea zile, morula, a cărei cavitate are jumătate din volum, devine un blastocist, format din două tipuri de celule:

  1. Trofoblastul este un înveliș exterior format din epiteliu cu un singur strat situat în jurul cavității interne. Sarcina trofectodermului este de a regla și controla implantarea embrionului în endometru, dezvoltarea placentei și a membranelor extraembrionare.
  2. Embrioblast (masă intracelulară) - masa servește ca bază pentru formarea țesuturilor și organelor copilului nenăscut.

Ovocitul este înconjurat de o membrană strălucitoare de consistență densă (Zona pellucida), care îndeplinește două funcții: împiedică mai mult de un spermatozoid să pătrundă în ovul și ține blastomerele împreună.

Pe măsură ce embrionul crește, cavitatea intraembrionară se extinde, provocând ruperea membranei, ducând la eliberarea sau ecloziunea blastocistului.

În această etapă, embrionul este evaluat conform următoarelor criterii:

  • volumul cavității interne;
  • gradul de ieșire dincolo de cochilie;
  • densitatea trofectodermului;
  • numărul de embrioblaste.

Calitatea este indicată prin cifre (1–5), cantitatea prin litere (A-C).

În a cincea zi, blastocistele sunt transferate în uter sau înghețate.

Blastocisturile sunt evaluate în funcție de gradul de maturitate (blastulație):

  • gradul I - blastocist precoce cu o cavitate internă mai mică de 50% din volumul embrionului;
  • al doilea – o cavitate mai mare de 50% din volum;
  • al treilea – cavitatea ocupă 100% din volumul embrionului;
  • al patrulea - un blastocist expandat cu o cavitate care devine mai mare decât coaja (Zona pellucida), care devine mai subțire;
  • al cincilea – pătrunderea trofoblastului prin membrană;
  • al șaselea – blastocistul a părăsit Zona pellucida.

Evaluarea embrioblastului:

Cel mai important criteriu pentru masa intracelulară (ICM) este densitatea și gruparea. Embrionul este considerat a fi de calitate superioară dacă există o densitate mare de ECM.

  • A – o cantitate mare de masă intracelulară dens grupată.
  • B – numărul de celule și densitatea medie.
  • C – cantitatea de ECM este nesemnificativă.

Criterii pentru trofectoderm – cantitate și dimensiune mică:

  • A – numeroase celule trofectoderme.
  • B – număr nesemnificativ de celule.
  • C – celule de dimensiuni mari în cantități mici.

Gradul de supraviețuire a embrionului în cavitatea uterină este evaluat după două săptămâni prin testarea sângelui pentru hCG. Informații mai fiabile vor fi obținute folosind diagnosticul cu ultrasunete în trei săptămâni. Probabilitatea de sarcină depinde în mare măsură de calitatea embrionilor implantați.

Datele morfologice utilizate pentru evaluarea embrionilor sunt necesare și de bază, dar nu sunt întotdeauna suficiente. Uneori, atunci când embrionii de înaltă calitate sunt transferați, nu se implantează. În alte cazuri, când sunt transferați embrioni de calitate scăzută, apare sarcina. Prin urmare, embriologii folosesc opțiuni suplimentare de evaluare pentru a prezice implantarea.

Dezvoltarea embrionilor este un proces complex, care necesită forță de muncă, în care trebuie luate în considerare o mulțime de nuanțe subtile, ceea ce numai specialiștii de înaltă profesie pot face.

Dacă în timpul programului FIV a fost posibilă aducerea a 40% dintre embrioni în stadiul de blastocist de o calitate excelentă, atunci programul este considerat de succes.

În acest sens, criotehnologiile utilizate în protocoalele FIV sunt de neprețuit, deoarece este posibil nu numai transferul de embrioni de înaltă calitate în uter, ci și înghețarea celor rămași. Acest avantaj vă permite să utilizați biomaterialul crioînghețat în timpul următorului transfer, ocolind mai mulți pași nesiguri și scumpi.

Multumesc mult pentru acest articol. MARGO (mi-am schimbat ava)


Toate etapele de cultivare a embrionilor sunt controlate de un embriolog.
După fuziunea materialului genetic (ADN) al ovulului și al spermei, se formează un zigot. Primul ciclu de diviziune celulară este cel mai lung și durează aproximativ 24 de ore.
Cele două celule egale rezultate se numesc blastomeri.
Blastomerii sunt celule care sunt inițial identice ca structură, biochimie și potențial de dezvoltare. Au o proprietate remarcabilă - capacitatea de a forma ulterior orice celule ale corpului. Cu toate acestea, această abilitate se pierde în stadiul de 8 blastomere, deoarece apoi blastomerele dobândesc specializare. Din această cauză, deteriorarea embrionului care are loc în stadiul de până la 8 blastomeri este ușor compensată.
În același timp, este posibilă împărțirea embrionului în 2 sau mai multe părți, dând naștere la gemeni identici...
Ulterior, fragmentarea embrionului continuă.
În a 2-a zi (48 ore) după puncție - stadiul 2-4 blastomeri (eventual 6-8 blastomeri).
Unii embrioni în acest moment pot rămâne în urmă în dezvoltare sau pot înceta să se divizeze complet.
În a 3-4-a zi - 6-8 blastomeri (eventual 8-16).
La atingerea stadiului de 12-14 blastomeri, embrionul capătă o formă sferică cu contururi netede și se numește morula.
În condiții naturale, embrionul intră în uter în acest stadiu.
În a 5-a zi - blastocist (adică mai mult de 16 blastomere).
În a 5-a zi, blastocistul iese din înveliș și are loc ecloziunea naturală.
Până în acel moment, membrana este deja subțiată și întinsă; printr-un mic spațiu, blastocismul este eliberat și începe implantarea.
Posibilitatea de cultivare până la stadiul de blastocist deschide oportunități mari de selectare a celor mai buni embrioni, face ca momentul intrării embrionului în uter să fie mai fiziologic și, de asemenea, crește procentul de implantare.
Pacienții noștri aud adesea despre așa-numita calitate a embrionilor. Ce este asta?
Embrionii sunt evaluați pentru forma și prezența sau absența fragmentării, rata fragmentării lor și, ca urmare, capacitatea estimată de implantare (atașarea embrionului în uter după transfer).

clasa 1 (A) - calitate excelentă a embrionilor.
Ele sunt caracterizate prin:
- viteza cea mai mare de zdrobire,
- forma corectă a blastomerilor, contururi clare,
- absența fragmentelor fără nucleu,
ceea ce înseamnă capacitate mare de implantare.

clasa 2 (B) - bun
blastomere neuniforme și/sau fragmente neuniforme de citoplasmă mai mici de 10% din volum
capacitate mare de implantare
clasa 3 (C) - satisfăcător
prezența fragmentării 10-50%

clasa 4 (D) - nesatisfăcător
prezența fragmentării mai mult de 50%

Din păcate, nu există un sistem unic acceptat pentru evaluarea „calității” unui embrion în lume. De regulă, se iau în considerare următorii indicatori: numărul de celule, ordinea aranjamentului lor, gradul de fragmentare, grosimea membranelor din jurul embrionului etc.
De obicei, calitatea embrionului este evaluată nu mai devreme de 48 de ore după extragerea ovulelor. Până la această oră (până la sfârșitul celei de-a doua zile) ar trebui să existe cel puțin două celule; este mai bine dacă embrionul este format din 3-4 celule. După 72 de ore (până la sfârșitul celei de-a treia zile), embrionul ar trebui să fie format din cel puțin 6 celule și, de preferință, 7 sau mai multe. În general, embrionii formați dintr-un număr mai mare de celule, aranjați ordonat și în absența fragmentării au mai multe șanse de a supraviețui. Calitatea embrionilor este evaluată la microscop într-un laborator de FIV, ceea ce ne permite să prezicem probabilitatea unei sarcini după transferul embrionului. În acest proces intervin însă mult mai mulți factori, care nu pot fi luați în considerare la nivelul actual de dezvoltare științifică, astfel că previziunile obținute nu se adeveresc întotdeauna.
Embrionii obținuți după fecundarea ovocitelor de la același pacient diferă adesea în ceea ce privește viteza de clivaj și parametrii morfologici. Este în general acceptat că embrionii cu cea mai mare rată de clivaj, ale căror blastomeri au o formă regulată și fără fragmente fără nucleu, au capacitatea maximă de implantare. Astfel de embrioni sunt clasificați în clasa 1 (A). Graduarea embrionilor în funcție de calitate este arbitrară și variază în diferite laboratoare. Cu toate acestea, se bazează, de regulă, pe natura fragmentării embrionului, pe forma și dimensiunea blastomerelor. Astfel, un embrion cu blastomeri inegale și/sau fragmente de citoplasmă care ocupă mai puțin de 10% din volum corespunde clasei 2 (B); în prezența fragmentării 10 50% clasa 3 (C), mai mult de 50% clasa 4 (D).
Lucrările privind analiza influenței calității embrionilor transferați în cavitatea uterină asupra frecvenței de implantare a acestora sunt numeroase, dar greu de comparat din cauza metodelor diferite de evaluare a calității. Aproximativ 20% din embrionii de clasa A-B transferați se implantează, dar această rată scade la 1,5% pentru embrionii foarte fragmentați. Rezultatele clinicii Bourn Hall (Anglia) sunt impresionante, arătând că 90% dintre pacientele care au rămas însărcinate după FIV și ET au primit cel puțin un embrion de clasa A în timpul transferului de embrioni. embrionii transferați și frecvența avortului spontan.
Motivele pentru calitatea slabă a embrionului pot include:
calitate slabă a spermatozoizilor sau calitate slabă a ovulelor. Se crede că, dacă embrionul crește prost inițial, atunci problema este în ovul, iar dacă dezvoltarea merge bine în primele două zile, apoi încep problemele, atunci problema este calitatea proastă a spermei.

Clasificarea blastocistelor.

Există mai multe clasificări ale blastocistelor, dar toate sunt similare. Calitatea blastocistului este determinată de trei parametri principali - dimensiunea (volumul cavității blastocistului), calitatea masei celulare interne (celule care dau naștere tuturor țesuturilor viitorului embrion) și calitatea trofectodermului (celule). care ulterior dau naștere tuturor membranelor extraembrionare - corionul, placenta Prezența absenței eclozării naturale - o ruptură punctuală a membranei embrionare și ecloziunea blastocistului din aceasta.

Cifrele indică dimensiunea blastocistului - stadiul expansiunii sale.
1 - precoce, cavitate aproximativ jumătate din volumul blastocistului;
2 - mediu, cavitatea este mai mult de jumătate din volum, dar dimensiunea blastocistului nu este cu mult mai mare decât dimensiunea embrionului de scindare;
3 - blastocist expandat - cavitatea ocupă cea mai mare parte a volumului blastocistului, zona pellucida este subțiată, volumul blastocistului este de 2 sau mai multe ori volumul embrionului fragmentat;
4 - blastocist care a intrat în ecloziune naturală (hatching);
5 - blastocist în ecloziune după PGD;
6 - blastocist complet eclozat.

Prima literă denotă calitatea masei celulare interioare - masa de celule din care se va dezvolta embrionul însuși în viitor.
A - ECM dens ambalat, suficient de dimensionat, clar vizibil, fără incluziuni, vacuole, fire etc.;
B - ECM este clar vizibil, dar are defecte minore (volum mic, împachetat slab, celule puține, incluziuni etc.);
C - ECM fie nu se distinge, fie prezintă tulburări grave în structură;
D - ECM degenerativă.

A doua literă a abrevierei denotă calitatea trofoblastului - stratul celular care înconjoară complet blastocistul. Ulterior, toate membranele extraembrionare ale embrionului se vor dezvolta din acesta; este responsabil pentru introducerea embrionului în peretele uterului - implantare.
A - trofoblastul este bine organizat, multicelular și monostratificat;
B - trofoblastul este format din mai multe straturi de celule, celulele sunt distribuite neuniform sau sunt mai puține celule decât în ​​mod normal;
C - trofoblastul este format dintr-un număr mic de celule, sau are incluziuni, vacuole, fire și alte abateri de la normă;
D - trofoblast degenerativ.

Cultivare

Începutul cultivării embrionilor are loc a doua zi după recoltarea foliculilor. Un embriolog evaluează calitatea embrionilor în timpul FIV. Apoi, celulele reproductive feminine și masculine sunt conectate, după un timp medicul examinează rata de diviziune a biomaterialului la microscop.

Data transferului blastocistului este determinată în funcție de cantitatea de biomaterial. Clasificarea embrionilor după calitate în timpul FIV este determinată de zi.

Cultivarea embrionilor este una dintre etapele FIV, susținând activitatea vitală a embrionului înainte de a fi implantat în uter.

Zigotul este plasat într-un lichid similar ca temperatură și compoziție trompelor uterine. Un lichid similar este creat în condiții de laborator. Pentru a preveni moartea prematură a celulelor, acestea sunt în mod constant sub supravegherea personalului medical.

Ce calitate sunt embrionii?

  1. Ziua 2 – contururile blastomerelor sunt clare, forma corectă, și există o capacitate mare de implantare;
  2. Ziua 3 – blastomerele și citoplasmele sunt neuniforme, capacitatea de implantare normală;
  3. Ziua 4 – capacitate de implantare satisfăcătoare;
  4. mai mult de 4 zile – capacitate de implantare nesatisfăcătoare.

Pentru a selecta cei mai viabili embrioni, ei încearcă să folosească cât mai multe ouă.

Calitate

Un embrion cu 5 celule este considerat norma și este destul de des folosit în practica medicală. Pentru ca procedura FIV să aibă succes, gameții trebuie cultivați. Calitatea embrionilor pentru transfer în timpul FIV depinde de mulți factori.

Ce determină calitatea embrionilor în timpul FIV:

  1. ecologie;
  2. obiceiuri proaste;
  3. prezența unei boli a organelor genitale;
  4. sistemul imunitar;
  5. greutate excesiva;
  6. dieta dezechilibrata;
  7. situații stresante;
  8. dezechilibre hormonale.

Clasele de embrioni în FIV indică calitatea biomaterialului, de care depinde rezultatul procedurii.

Calitatea embrionilor și clasele lor sunt strâns legate între ele. Sunt 4 clase:

  • clasa A – fragmente fără nucleu complet absente;
  • clasa B – nu mai mult de 20% din fragmentele fără nucleu din volumul total;
  • clasa C – conținut de fragmente anucleare de la 21% la 50%;
  • clasa D – conține mai mult de 50% fragmente fără nucleu, categoria nu este utilizată pentru proceduri ulterioare.

Fragmentarea embrionului în timpul FIV indică cel mai adesea un fel de tulburare genetică în organele reproducătoare feminine sau masculine.

Clase

Astăzi, calitatea embrionilor este evaluată prin numărul de celule, precum și prin gradul de fragmentare.Dacă pe card scrie: embrionii 8a, asta înseamnă că zigotul conține 8 celule, iar fragmentarea este complet absentă. Se ia în considerare și uniformitatea strivirii, prezența vacuolelor și absența blastomerilor nucleari.

Embrionul bl1 este un mic blastocist, a cărui calitate este foarte greu de evaluat în acest stadiu. Implantarea dă rezultate pozitive dacă masa celulară internă a blastocistului și a trofoblastului sunt bine dezvoltate.

Un embrion de clasa 4aa este un blastocist de bună calitate și este implantat cu o probabilitate de peste 70%. Prima verificare a calității embrionului are loc la 48 de ore după extragerea ovulelor pentru FIV. Fertilizarea ouălor și calitatea zigotului sunt evaluate în prima zi după replantare.

Embrionii sunt selectați în funcție de următoarele criterii:

  1. gradul de fragmentare;
  2. calitate;
  3. uniformitatea și forma celulei;
  4. timpul diviziunii celulare;
  5. absența citoplasmei.

Pentru FIV, doar cei mai puternici embrioni rămân pentru procesare.

Protocolul de cultivare

Se efectuează zilnic un protocol de cultură de embrioni pentru a selecta embrionii mai puternici.

Dezvoltarea embrionilor are loc după cum urmează:

  • 1 zi – se efectuează puncția;
  • Ziua 2 - celulele încep să se dividă, cu o dezvoltare normală ar trebui să existe de la 2 până la 4 blastomeri;
  • Ziua 3 – celulele sănătoase continuă să se dividă, există deja 6 până la 8 blastomeri;
  • Ziua 4 – celulele sunt împărțite în 10-16 blastomeri;
  • Ziua 5-6 – blastomerele se transformă în blastociste, ceea ce crește șansele de implantare.

Cel mai bun mediu pentru cultivarea embrionilor este considerat a fi unul care este aproape de mediul fluid găsit în trompele uterine. În fiecare caz individual, cultivarea individuală a embrionilor se realizează într-un ciclu natural, deoarece fiecare femeie are propriul ei timp al ciclului de ovulație.

Protocolul este descifrat exclusiv de un embriolog pe baza formei, culorii și mărimii blastocistului. Tehnicianul de laborator examinează fiecare embrion zilnic și face o notă pe diagramă. Această abordare ajută la alegerea celei mai potrivite probe pentru implantare în trompele uterine ale viitoarei mame.

Contraindicații

FIV nu are contraindicații, cu toate acestea, cu inserția intrauterină a embrionului, există unii factori sub care această procedură nu este recomandată.

Contraindicațiile includ:

  • tumori de diverse etiologii;
  • fibrom;
  • disfuncție a organelor de reproducere;
  • absența uterului;
  • boli infecțioase;
  • procese inflamatorii;
  • exacerbarea bolilor cronice.

Dacă FIV nu dă rezultate pozitive de mai multe ori la rând, înseamnă că există probleme cu ovulele sau spermatozoizii. În acest caz, medicii sfătuiesc să alegeți o altă metodă de obținere a biomaterialului, de exemplu, ICSI. Procedura presupune introducerea spermatozoizilor în citoplasma ovocitului.

Indiferent de metoda de fertilizare folosită, o parte din material va rămâne inutilizabilă. Unii embrioni mor rapid, oprindu-și creșterea, alții au un genotip nepotrivit. Conform statisticilor, în cel mai bun caz, doar 68% dintre probe sunt potrivite. Cultivarea ajută la creșterea șanselor de atașare a embrionului la uter. Cu o bună pregătire, până la 95% din blastociste supraviețuiesc.

Caracteristicile embrionilor FIV

Caracteristicile embrionilor FIV

În procesul de stimulare a ovulației în prima etapă a FIV, medicii primesc nu una, ci mai multe celule germinale feminine simultan.

Toate celulele rezultate (ovocitele) sunt fertilizate folosind FIV sau ICSI. Cu toate acestea, nu toți embrionii sunt transferați în cavitatea uterină.

De regulă, aceștia sunt cei 1-2 embrioni cei mai promițători, în opinia embriologului.

Evaluăm calitatea embrionilor FIV în principal după morfologia lor. Există multe criterii de evaluare:

  1. Numărul de celule din embrion. În mod normal, nu ar trebui să fie mai mare sau mai mică decât cantitatea corespunzătoare zilei de dezvoltare a embrionului.
  2. Gradul de fragmentare (fragmente fără nuclee ale citoplasmei, numărul și locația cărora pot afecta dezvoltarea ulterioară a embrionului)
  3. Uniformitatea și sincronismul strivirii. După fuziunea ovulului și spermatozoizilor, se formează un zigot (un ovul fertilizat care începe să se dividă activ). Acest proces se numește clivaj, iar celulele embrionare se numesc blastomeri. Ele trebuie să aibă aceeași formă și dimensiune.
  4. Prezența sau absența diferitelor incluziuni în citoplasma celulară.

De asemenea, acordăm atenție prezenței așa-numitelor blastomere multinucleare. Acest termen se referă la prezența blastomerelor care au nu unul, ci mai multe nuclee. În mod normal, astfel de blastomeri nu ar trebui să existe.

Evaluarea caracteristicilor embrionului FIV

Există mai multe clasificări ale calității embrionilor în primele zile de dezvoltare. În primul rând, specialistul se uită la numărul de celule.

În mod normal, în a 2-a zi de dezvoltare, embrionul este format din 2-4 celule, în a 3-a zi - de la 6-8, iar în a 4-a zi - numărul celulelor este greu de numărat, deoarece fuziunea lor începe și embrionul. se transformă într-o morula.

Când se descrie un embrion cu 2-3 zile de dezvoltare, la numărul se adaugă o literă care indică numărul de blastomere, reflectând calitatea și morfologia blastomerilor înșiși și prezența sau absența fragmentării.

  • A – nu există fragmente fără nucleu, blastomerele sunt netede, de aceeași dimensiune, au un singur nucleu, citoplasmă omogenă;
  • B – numărul fragmentelor libere de nucleu ale citoplasmei ajunge la 25%, dar nu depășește această limită;
  • C – numărul de fragmente fără nuclei variază de la 25 la 50%, există tulburări în dimensiunea și forma blastomerilor, există incluziuni în citoplasmă;
  • D – mai mult de 50% fragmente fără nucleu etc.

Această condiție se numește fragmentare totală. Astfel de embrioni nu sunt utilizați pentru transferul în cavitatea uterină (cu excepția situației în care nu există embrioni de altă calitate, iar pacienta insistă asupra transferului). Trebuie spus că și în astfel de cazuri poate apărea o sarcină normală, doar probabilitatea de apariție va fi de multe ori mai mică decât la transferul de embrioni de calitate A sau B.

La VitroClinic folosim caracteristici alfanumerice. În acest caz, numărul reflectă numărul de blastomeri din embrion, iar litera indică morfologia și calitatea.

Clasificarea blastocistelor FIV

Un blastocist este un embrion cu 5-6 zile de dezvoltare. Este format din câteva zeci de celule conectate într-o formațiune sferică cu o cavitate, înconjurată de o membrană. După ruperea acestei membrane (eclozare), începe procesul de implantare (introducerea embrionului în membrana mucoasă a uterului).

Există mai multe clasificări ale blastocistelor; la VitroClinic folosim scala Gardner. Această scală este formată dintr-un număr și două litere mari. Numărul descrie dimensiunea cavității blastocistului, prima literă este calitatea embrioblastului (masa celulară interioară), a doua literă este trofoblastul (calitatea masei celulare exterioare):

1) Dimensiunea blastocistului, volumul cavității sale:

  1. Cavitatea ocupă mai puțin de 50% din blastocist.
  2. Cavitatea ocupă 50% din blastocist.
  3. Cavitatea ocupă mai mult de 75% din blastocist.
  4. Blastocist, a cărui cavitate este de 2 ori masa celulară.
  5. Blastocist în care a început deschiderea cochiliei (clozare)
  6. Blastocist, complet eliberat de membrană, gata de implantare.

2) Caracteristicile celulelor din care se va dezvolta embrionul (masa celulară internă):

  • A. Există multe celule, granițele dintre celule nu se pot distinge.
  • B. Formele celulare se disting, se remarcă prezența unor defecte minore în ele (granularitate etc.).
  • C. Defectele celulelor sunt semnificative, există semne de apoptoză.
  • D. Degenerarea compoziției celulare.

3) Caracteristicile celulelor masei celulare exterioare care formeaza structuri extraembrionare (placenta, membrana amniotica).

Începutul cultivării embrionilor are loc a doua zi după recoltarea foliculilor. Un embriolog evaluează calitatea embrionilor în timpul FIV. Apoi, celulele reproductive feminine și masculine sunt conectate, după un timp medicul examinează rata de diviziune a biomaterialului la microscop.

Data transferului blastocistului este determinată în funcție de cantitatea de biomaterial. Clasificarea embrionilor după calitate în timpul FIV este determinată de zi.

Cultivarea embrionilor este una dintre etapele FIV, susținând activitatea vitală a embrionului înainte de a fi implantat în uter.

Zigotul este plasat într-un lichid similar ca temperatură și compoziție trompelor uterine. Un lichid similar este creat în condiții de laborator. Pentru a preveni moartea prematură a celulelor, acestea sunt în mod constant sub supravegherea personalului medical.

Ce calitate sunt embrionii?

  1. Ziua 2 – contururile blastomerelor sunt clare, forma corectă, și există o capacitate mare de implantare;
  2. Ziua 3 – blastomerele și citoplasmele sunt neuniforme, capacitatea de implantare normală;
  3. Ziua 4 – capacitate de implantare satisfăcătoare;
  4. mai mult de 4 zile – capacitate de implantare nesatisfăcătoare.

Pentru a selecta cei mai viabili embrioni, ei încearcă să folosească cât mai multe ouă.

Calitate

Un embrion cu 5 celule este considerat norma și este destul de des folosit în practica medicală. Pentru ca procedura FIV să aibă succes, gameții trebuie cultivați. Calitatea embrionilor pentru transfer în timpul FIV depinde de mulți factori.


Ce determină calitatea embrionilor în timpul FIV:

  1. ecologie;
  2. obiceiuri proaste;
  3. prezența unei boli a organelor genitale;
  4. sistemul imunitar;
  5. greutate excesiva;
  6. dieta dezechilibrata;
  7. situații stresante;
  8. dezechilibre hormonale.





Clasele de embrioni în FIV indică calitatea biomaterialului, de care depinde rezultatul procedurii.

Calitatea embrionilor și clasele lor sunt strâns legate între ele. Sunt 4 clase:

  • clasa A – fragmente fără nucleu complet absente;
  • clasa B – nu mai mult de 20% din fragmentele fără nucleu din volumul total;
  • clasa C – conținut de fragmente anucleare de la 21% la 50%;
  • clasa D – conține mai mult de 50% fragmente fără nucleu, categoria nu este utilizată pentru proceduri ulterioare.

Fragmentarea embrionului în timpul FIV indică cel mai adesea un fel de tulburare genetică în organele reproducătoare feminine sau masculine.

Clase

Astăzi, calitatea embrionilor este evaluată prin numărul de celule, precum și prin gradul de fragmentare.Dacă pe card scrie: embrionii 8a, asta înseamnă că zigotul conține 8 celule, iar fragmentarea este complet absentă. Se ia în considerare și uniformitatea strivirii, prezența vacuolelor și absența blastomerilor nucleari.


Embrionul bl1 este un mic blastocist, a cărui calitate este foarte greu de evaluat în acest stadiu. Implantarea dă rezultate pozitive dacă masa celulară internă a blastocistului și a trofoblastului sunt bine dezvoltate.

Un embrion de clasa 4aa este un blastocist de bună calitate și este implantat cu o probabilitate de peste 70%. Prima verificare a calității embrionului are loc la 48 de ore după extragerea ovulelor pentru FIV. Fertilizarea ouălor și calitatea zigotului sunt evaluate în prima zi după replantare.


Tabel - Calitatea embrionilor pentru transfer

Embrionii sunt selectați în funcție de următoarele criterii:

  1. gradul de fragmentare;
  2. calitate;
  3. uniformitatea și forma celulei;
  4. timpul diviziunii celulare;
  5. absența citoplasmei.

Pentru FIV, doar cei mai puternici embrioni rămân pentru procesare.

Protocolul de cultivare

Se efectuează zilnic un protocol de cultură de embrioni pentru a selecta embrionii mai puternici.


Dezvoltarea embrionilor are loc după cum urmează:

  • 1 zi – se efectuează puncția;
  • Ziua 2 - celulele încep să se dividă, cu o dezvoltare normală ar trebui să existe de la 2 până la 4 blastomeri;
  • Ziua 3 – celulele sănătoase continuă să se dividă, există deja 6 până la 8 blastomeri;
  • Ziua 4 – celulele sunt împărțite în 10-16 blastomeri;
  • Ziua 5-6 – blastomerele se transformă în blastociste, ceea ce crește șansele de implantare.

Cel mai bun mediu pentru cultivarea embrionilor este considerat a fi unul care este aproape de mediul fluid găsit în trompele uterine. În fiecare caz individual, cultivarea individuală a embrionilor se realizează într-un ciclu natural, deoarece fiecare femeie are propriul ei timp al ciclului de ovulație.

Protocolul este descifrat exclusiv de un embriolog pe baza formei, culorii și mărimii blastocistului. Tehnicianul de laborator examinează fiecare embrion zilnic și face o notă pe diagramă. Această abordare ajută la alegerea celei mai potrivite probe pentru implantare în trompele uterine ale viitoarei mame.

Contraindicații

FIV nu are contraindicații, cu toate acestea, cu inserția intrauterină a embrionului, există unii factori sub care această procedură nu este recomandată.


Contraindicațiile includ:

  • tumori de diverse etiologii;
  • fibrom;
  • disfuncție a organelor de reproducere;
  • absența uterului;
  • boli infecțioase;
  • procese inflamatorii;
  • exacerbarea bolilor cronice.

Dacă FIV nu dă rezultate pozitive de mai multe ori la rând, înseamnă că există probleme cu ovulele sau spermatozoizii. În acest caz, medicii sfătuiesc să alegeți o altă metodă de obținere a biomaterialului, de exemplu, ICSI. Procedura presupune introducerea spermatozoizilor în citoplasma ovocitului.

Indiferent de metoda de fertilizare folosită, o parte din material va rămâne inutilizabilă. Unii embrioni mor rapid, oprindu-și creșterea, alții au un genotip nepotrivit. Conform statisticilor, în cel mai bun caz, doar 68% dintre probe sunt potrivite. Cultivarea ajută la creșterea șanselor de atașare a embrionului la uter. Cu o bună pregătire, până la 95% din blastociste supraviețuiesc.

Astăzi, calitatea embrionilor este evaluată în principal prin morfologie - aspectul exterior al embrionului. Există o mulțime de parametri morfologici și caracteristici ale embrionului, cu toate acestea, importanța principală pentru embrionii de 2-3 zile de dezvoltare este numărul de celule (trebuie să corespundă zilei de dezvoltare), gradul de fragmentare (volumul ocupate de bucăți fără nucleu ale citoplasmei embrionului), uniformitatea fragmentării (blastomerii - celulele embrionului în stadiul de fragmentare - trebuie să aibă o formă regulată și dimensiuni egale), prezența/absența vacuolelor și a altor incluziuni în citoplasma, absența blastomerelor multinucleare (nucleul celular s-a divizat, iar citoplasma rămâne în urmă).

Iată care sunt normele pentru numărul de celule (blastomere) în primele zile de dezvoltare (ziua puncției - zero):
Ziua 2 - 2-6 celule
3 zile - 4-10 celule
4 zile - mai mult de 8 celule

Cea mai comună clasificare alfanumerică bazată pe calitatea embrionilor este veche de 2-3 zile. Ea reflectă în principal gradul de fragmentare și numărul de celule din embrion. Acesta este de obicei scris astfel: 8A, 4B, 2C etc., unde numărul înseamnă numărul de celule din embrion, iar litera înseamnă procentul de fragmentare.

A - fără fragmentare
B - fragmentare mai mică de 25%
C - fragmentare 25-50%
D - fragmentare totală, mai mult de 50%. Astfel de embrioni nu sunt transferați în cavitatea uterină și nu sunt crioconservați.

Clasificarea blastocistelor:

Există mai multe clasificări ale blastocistelor, dar toate sunt similare. (Vă rugăm să rețineți articolul: „Transferul blastocistului”) Calitatea blastocistului este determinată de trei parametri principali - dimensiunea (volumul cavității blastocistului), calitatea masei celulare interne (celule care dau naștere tuturor țesuturilor viitorului embrion) și calitatea trofectodermului ( celule care ulterior dau naștere tuturor membranelor extraembrionare - corionul, placenta Prezența /lipsă eclozarea naturală - o ruptură punctuală a membranei embrionare și ecloziunea blastocistului din aceasta.

Cifrele indică dimensiunea blastocistului - stadiul expansiunii sale.

1 - precoce, cavitate aproximativ jumătate din volumul blastocistului;

2 - mediu, cavitatea este mai mult de jumătate din volum, dar dimensiunea blastocistului nu este cu mult mai mare decât dimensiunea embrionului de scindare;

3 - blastocist expandat - cavitatea ocupă cea mai mare parte a volumului blastocistului, zona pellucida este subțiată, volumul blastocistului este de 2 sau mai multe ori volumul embrionului fragmentat;

4 - blastocist care a intrat în ecloziune naturală (hatching);

5 - blastocist în ecloziune după PGD;

6 - blastocist complet eclozat.

Prima literă denotă calitatea masei celulare interioare - masa de celule din care se va dezvolta embrionul însuși în viitor.

A - ECM dens ambalat, suficient de dimensionat, clar vizibil, fără incluziuni, vacuole, fire etc.;

B - ECM este clar vizibil, dar are defecte minore (volum mic, împachetat slab, celule puține, incluziuni etc.);

C - ECM fie nu se distinge, fie prezintă tulburări grave în structură;

D - ECM degenerativă.

A doua literă a abrevierei denotă calitatea trofoblastului - stratul celular care înconjoară complet blastocistul. Ulterior, toate membranele extraembrionare ale embrionului se vor dezvolta din acesta; este responsabil pentru introducerea embrionului în peretele uterului - implantare.

A - trofoblastul este bine organizat, multicelular și monostratificat;

B - trofoblastul este format din mai multe straturi de celule, celulele sunt distribuite neuniform sau sunt mai puține celule decât în ​​mod normal;

C - trofoblastul este format dintr-un număr mic de celule, sau are incluziuni, vacuole, fire și alte abateri de la normă;

D - trofoblast degenerativ.

După cum știți, FIV este o procedură destul de complexă și costisitoare, care necesită mult timp și bani, dar, din păcate, nu garantează un rezultat pozitiv.

Motivele eșecului pot fi diferite, atât fiziologice, cât și psihologice. Și dacă medicul dumneavoastră vă va ajuta să faceți față primelor, atunci problemele psihologice, de regulă, rămân nesupravegheate în procesul de pregătire pentru FIV. Cu toate acestea, influența lor asupra rezultatului este foarte mare!

Cum să afli: este infertilitatea ta o consecință a problemelor psihologice?

Cum să elimini influența factorilor psihologici negativi în timpul procesului de FIV?

Cum să vă creșteți șansele de FIV cu ajutor psihologic?

Diagnosticul online al cauzelor psihosomatice ale infertilității la femei vă va ajuta să răspundeți la aceste întrebări.
Pe baza rezultatelor testelor: identificarea barierelor psihologice în calea sarcinii; recomandări de la psihologi practicanți.

Astăzi, calitatea embrionilor este evaluată în principal prin morfologie - aspectul exterior al embrionului. Există o mulțime de parametri morfologici și caracteristici ale embrionului, dar importanța principală pentru embrionii de 2-3 zile de dezvoltare este numărul de celule (trebuie să corespundă zilei de dezvoltare), gradul de fragmentare (volumul ocupat). prin bucăți fără nucleu ale citoplasmei embrionului), uniformitatea fragmentării (blastomerii - celulele embrionului în stadiul de fragmentare - trebuie să aibă o formă regulată și dimensiuni egale), prezența/absența vacuolelor și a altor incluziuni în citoplasmă, absența blastomerelor multinucleare (nucleul celular s-a divizat, iar citoplasma rămâne în urmă).

Iată care sunt normele pentru numărul de celule (blastomere) în primele zile de dezvoltare (ziua puncției - zero): Ziua 2 - 2-6 celule Ziua 3 - 4-10 celule Ziua 4 - mai mult de 8 celule

Cea mai comună clasificare alfanumerică bazată pe calitatea embrionilor este veche de 2-3 zile. Ea reflectă în principal gradul de fragmentare și numărul de celule din embrion. De obicei se scrie astfel: 8A, 4B, 2C etc., unde numărul înseamnă numărul de celule din embrion, iar litera înseamnă procentul de fragmentare A - fără fragmentare B - fragmentare mai mică de 25% C - fragmentare 25-50% D - fragmentare totală, mai mult de 50%. Astfel de embrioni nu sunt transferați în cavitatea uterină și nu sunt crioconservați.Acest lucru este de obicei scris astfel: 8A, 4B, 2C etc.

Clasificarea blastocistelor.
Există mai multe clasificări ale blastocistelor, dar toate sunt similare. Calitatea blastocistului este determinată de trei parametri principali - dimensiunea (volumul cavității blastocistului), calitatea masei celulare interne (celule care dau naștere tuturor țesuturilor viitorului embrion) și calitatea trofectodermului (celule). care ulterior dau naștere tuturor membranelor extraembrionare - corionul, placenta.Prezența absenței eclozării naturale - o ruptură punctuală a membranei embrionului și ecloziunea blastocistului din acesta.Numerele indică dimensiunea blastocistului - stadiul a expansiunii sale 1 - timpuriu, cavitatea este aproximativ jumătate din volumul blastocistului; 2 - mediu, cavitatea este mai mult de jumătate din volum, dar dimensiunea blastocistului nu este mult mai mare decât dimensiunea embrionului zdrobit. ; 3 - blastocist expandat - cavitatea ocupă cea mai mare parte a volumului blastocistului, zona pellucida este subțiată, volumul blastocistului este de 2 sau mai multe ori mai mare decât volumul embrionului fragmentat; 4 - blastocist care a intrat în natural eclozare (eclozare);5 - blastocist în ecloziune după PGD ;6 - blastocist complet eclozat.Prima literă indică calitatea masei celulare interne - masa de celule din care se va dezvolta embrionul însuși în viitor.A - dens împachetat , ECM suficient de dimensionat, clar vizibil, fără incluziuni, vacuole, corzi, etc.; B - ECM este clar vizibil, dar prezintă defecte minore (volum mic, slab împachetat, puține celule, incluziuni etc.); C - ECM fie nu se poate distinge, fie are tulburări grave în structură D - ECM degenerativă A doua literă a abrevierei indică calitatea trofoblastului - stratul celular care înconjoară complet blastocistul. Ulterior, din acesta se vor dezvolta toate membranele extraembrionare ale embrionului, este responsabil de introducerea embrionului în peretele uterin - implantare.A - trofoblastul este bine organizat, multicelular și monostratificat; B - trofoblastul este format din mai multe straturi de celule, celulele sunt distribuite neuniform sau sunt mai puține celule decât în ​​mod normal; C - trofoblastul este format dintr-un număr mic de celule, sau are incluziuni, vacuole, cordoane și alte abateri de la normă; D - trofoblast degenerativ. Un exemplu este Bl1 (în blastocistile timpurii este încă dificil să se evalueze diferite populații de celule), Bl2AB , Bl3BB, Bl4AC etc. .P.

Descriere: Ziua 0. Imediat după puncție, se evaluează maturitatea complexelor ovocit-cumulus (OCC) rezultate. OCC cu un cumulus transparent conține de obicei un ovocit matur și primește un scor de „1-1”. În timpul puncției, este posibil să se obțină ovocite mature, imature, precum și degenerative și distruse. O evaluare precisă a stării ovocitului este posibilă numai după ce este curățat înainte de ICSI.

În ovocitele mature gata de fertilizare, este detectat primul corp polar. În protocolul embriologic, ovocitul matur este desemnat MII.

Dacă procesul de maturare a ovocitelor în folicul este întrerupt sau declanșatorul (CG) este introdus incorect, atunci există o probabilitate mare de a obține celule imature, denumite MI și GV (Fig. 1). Degenerarea completă a ovocitului (Deg) este, de asemenea, posibilă.

Fig. 1. Ovocite obţinute prin puncţia ovarelor după îndepărtarea cumulusului (denudare). A - MII, B - MI, C - GV. Pb – corp polar, ZP – zona pellucida

La 18-20 de ore după adăugarea spermatozoizilor sau a ICSI (ziua 1), în timpul fertilizării normale, se formează doi pronuclei. Aceștia sunt precursorii nucleelor ​​viitoarelor celule blastomere, în care ovulul fertilizat începe să se dividă. Cu o fertilizare adecvată, ambii pronuclei se disting clar. În acest caz, li se atribuie un scor de 2pN. Dacă nu sunt vizibili pronuclei, ceea ce se datorează de obicei lipsei de fertilizare, se înregistrează 0pN în protocol. Dacă fertilizarea este incorectă, pot apărea mai multe pronuclei, ceea ce se reflectă în înregistrare, de exemplu, 3pN, 6pN etc. (Fig. 2). Ovocitele fertilizate „incorect” nu sunt potrivite pentru lucrări ulterioare și sunt eliminate.


Fig 2. Prima zi de dezvoltare in vitro – formarea zigotului și formarea pronucleilor. A – 2pN (fertilizare normală) – doi pronuclei B – 3pN (fertilizare anormală) – mai mult de doi pronuclei.

Dezvoltarea ulterioară a embrionului, fragmentarea, are loc în cinci până la șase zile. Calitatea embrionilor este evaluată la 40-42 ore (2 zile), 72-74 ore (3 zile) și 120 ore (5 zile) după fertilizare. Fragmentarea embrionului trebuie să fie simetrică (se obțin blastomere de aceeași dimensiune) și uniformă (toți blastomerele suferă divizare). Pentru claritate, embriologii folosesc un sistem de evaluare a calității cu litere numerice, unde numărul indică numărul de blastomeri, iar litera calitatea acestora. Pentru a desemna un embrion de bună calitate, se folosește indicele literei „A”, mediu „B”, mic „C”. Sunt posibile și opțiuni intermediare, de exemplu AB, BA, BC, SV, atunci când este dificil să se ofere o evaluare fără ambiguitate (Fig. 3).

A 2-a zi (4A) A 3-a zi (8A) A 4-a zi (comp)

Fig. 3. Fragmentarea embrionului în primele trei zile in vitro și morula compactă în a 4-a zi de dezvoltare. Sunt prezentați embrioni de calitate excelentă (A). B – blastomer ZP – zona pellucida.

Pentru a doua zi de cultivare, embrionii cu patru blastomeri - 4A, 4AB, 4B - sunt considerați promițători. Pentru a treia - opt celule (8A, 8AB, 8B). De obicei, embrionii de proastă calitate (BC, SV, C) nu sunt tolerați; sunt lăsați până în a cincea zi și când se formează un blastocist normal, sunt înghețați sau transferați în uter. În cazul fragmentării neuniforme (prezența blastomerelor de diferite dimensiuni), potențialul de implantare al embrionului este redus, iar acest lucru este notat prin prefixul „un”, de exemplu 3Bun. Prezența fragmentelor citoplasmatice este denumită „fr”, de exemplu 8ВСfr (Fig. 4). Se evaluează și prezența vacuolelor. Când sunt vizualizate, este plasat marcajul „vac”. În mod normal, fiecare blastomer poartă un nucleu; dacă mai mult de un nucleu este vizualizat în cel puțin un blastomer, aceasta se numește multinucleare (mN) și indică o probabilitate semnificativă de patologie cromozomială a acestui embrion.


Fig. 4. Clivajul embrionului în primele trei zile in vitro. Sunt prezentați embrioni de calitate bună (BA, B) și satisfăcătoare (BC). În al doilea rând sunt embrioni cu diviziune neuniformă (3Bun și 4BAun).

Până la sfârșitul celei de-a treia și a patra zile de cultivare, embrionul începe să se compacteze (limitele celulelor sale devin imposibil de distins) și se pregătește să formeze un blastocist. Celulele sale pot fi parțial (p.comp) sau complet compactate (comp) (Fig. 5). De obicei, embrionii nu sunt evaluați în a patra zi din cauza conținutului scăzut de informații din această etapă de dezvoltare. Cu toate acestea, prezența compactării în a doua zi poate indica o dezvoltare anormală și trebuie reflectată în protocolul embriologic.



Fig 5. Etapa de compactare A 4-a zi de cultivare A – p.comp B - comp

În a cincea zi, la aproximativ 120 de ore după fertilizare, embrionul formează un blastocist (Bl) (Fig. 6). Evaluarea calității unui blastocist implică dimensiunea acestuia, care se reflectă în numere de la 1 la 5; starea masei celulare interioare (ICM) (de la „A” la „C”) și a celulelor din jur - trofoblastul (de la „a” la „c”). Cel mai bun pentru transfer vor fi blastocisti de dimensiuni de la 3 la 5, având un ECM multicelular și trofoblast - Bl4Aa, Bl4Ab. Blastocisturile de calitate medie sunt desemnate ca – Bl2Bb, Bl3Bb și de proastă calitate – BlCc.


Figura 6. Blastocisturi în a cincea zi de dezvoltare in vitro. e.bl – blastocist precoce, Bl3Ab – blastocist expandat, Bl5Ab – blastocist înainte de ecloziune, ICM – masă celulară internă.

Dezvoltarea ulterioară a embrionului are loc în uter după implantare. Pentru o implantare cu succes, blastocistul trebuie să iasă din zona pellucidă înconjurătoare. Acest proces se numește eclozare, sau eclozare. În cazul în care embriologul constată modificări ale zonei pellucide și după crioconservarea embrionilor, procesul de ecloziune independentă a blastocistului poate fi dificil și poate fi facilitat prin utilizarea eclozării asistate. În centrul nostru folosim cea mai eficientă eclozare asistată cu laser.

Cea mai mare rată de fertilizare a fost obținută atunci când embrionii au fost transferați în stadiul de blastocist. Deci, în centrul nostru este de 53%. În timp ce în timpul transferului în stadiul de 6-8 blastomeri - 47%.

Înghețarea și PGD sunt, de asemenea, cel mai bine realizate în stadiul de blastocist. Cu toate acestea, nu toți embrionii ajung la blastocist. Prin urmare, se acceptă în general următoarea abordare: dacă în a 5-a zi de cultură sunt mai puțin de 5 embrioni, cel puțin unul este transferat, restul se lasă până în a 5-a zi. Dintre cei care ajung la blastocist, încă unul poate fi transferat (transfer dublu), restul sunt înghețați. Dacă există 5 sau mai mulți embrioni în ziua 3, aceștia nu sunt transferați și lăsați să fie cultivați până în ziua 5. În ziua a 5-a, unul sau mai rar două blastociste sunt transferate, restul sunt înghețate.

În concluzie, trebuie menționat că criteriile morfologice descrise pentru aprecierea calității embrionilor sunt de bază, necesare, dar nu întotdeauna suficiente pentru selectarea unui embrion pentru transfer. Astfel, de multe ori după transferul de embrioni de cea mai bună calitate, implantarea nu are loc și, dimpotrivă, există cazuri de sarcină care apar și se dezvoltă cu succes atunci când sunt transferați embrioni de proastă calitate. Prin urmare, există metode suplimentare de predicție a implantării embrionare (time-laps, PGS, analiza metaboliților etc.), care completează criteriile morfologice și asigură colectiv selecția celui mai bun embrion.



Blastocistul în curs de ecloziune (ieșire din zona pelucidă pentru implantare)

A – microscopie luminoasă HMC contrast B – microscopie electronică cu scanare - ZP – zona pellucida TE – trofectoderm ECM – masă celulară internă

În ultimii ani, o metodă de naștere numită inseminare artificială a devenit din ce în ce mai populară. Rezultatul pozitiv al unei astfel de proceduri este determinat de diverși factori și de conformitatea cu tehnicile corect selectate în diferite etape ale ciclului. Există o anumită clasificare a embrionilor în timpul FIV, care ulterior vor fi transferați în uterul corpului feminin.

Caracteristicile inseminarii artificiale

Astăzi, inseminarea artificială este una dintre modalitățile de a restabili capacitatea corpului feminin de a da naștere unui copil. Această tehnică nu este la fel de complicată ca transplantul de celule germinale feminine, dar în același timp vă permite să obțineți rezultatul dorit.

Cum poate fi efectuată inseminarea artificială?

Toate tipurile de inseminare artificiala sunt proceduri destul de complexe, iar rezultatul final este influentat de mai multi factori. De aceea, potențialii părinți ar trebui să aibă răbdare și să creadă în succes.

O metodă comună pentru ca o femeie să rămână însărcinată este FIV, atunci când fertilizarea unui ovul obținut din organism este efectuată în condiții artificiale. Dezvoltarea embrionului într-o eprubetă este monitorizată timp de câteva zile, după care este plasat în organul reproducător al corpului feminin pentru o creștere ulterioară.

Clasificarea embrionilor

De obicei, se efectuează o evaluare vizuală a calității embrionilor pregătiți pentru transfer, precum și a caracteristicilor dezvoltării lor. În ziua puncției se efectuează fertilizarea ovocitelor și după aceea, în fiecare zi, un specialist monitorizează creșterea embrionilor la microscop și îi clasifică după o anumită schemă.

Calitatea embrionilor este evaluată luând în considerare diverse criterii în funcție de momentul zilei.


În prima zi după fertilizare, se evaluează eficacitatea procedurii, iar după aceea se acordă atenție primei diviziuni celulare a organismului în curs de dezvoltare. În zilele 2 și 3 începe procesul de fragmentare a celulelor embrionare și se evaluează numărul de blastomere. În a doua zi după fertilizare, numărul lor ar trebui să fie de 4-5, iar în a 3-a zi de dezvoltare crește la 6-8. În plus, specialistul acordă atenție formei și dimensiunii embrionilor, precum și prezenței fragmentării.

Cel mai adesea, există clasificări numerice și alfabetice bazate pe calitatea embrionilor din a doua - a treia zi. Vă permite să evaluați gradul de fragmentare și numărul de celule din embrion. De obicei, un număr este scris cu o literă, unde primul indicator reflectă numărul de celule din embrion, iar al doilea - procentul de fragmentare.

  • A - indică faptul că fragmentarea este complet absentă:
  • B - rata de fragmentare este de 25%;
  • C - nivelul de fragmentare a crescut la 25-50%;
  • Scorul D de fragmentare mai mare de 50%

De obicei, embrionii cu litera D nu pot fi transferați în cavitatea organului reproducător al femeii și nu sunt conservați.

Clasificarea blastocistelor

După ce cavitatea din interiorul morulei atinge 50% din volumul său, embrionul se numește blastocist. Formarea unui blastocist este considerată normală de la sfârșitul a 4 până la mijlocul a 6 zile, iar acest lucru are loc în principal în a cincea zi.

Componentele unui blastocist sunt considerate a fi două populații de celule:

  • trofoblastul este un epiteliu cu un singur strat care înconjoară cavitatea;
  • masă intracelulară, adică o joncțiune strânsă de celule.

Scopul principal al trofoblastului este implantarea cu succes a embrionului în țesutul endometrial al organului reproducător. Ulterior, celulele trofoblaste dau naștere la dezvoltarea tuturor membranelor neembrionare ale oului fetal. Toate țesuturile și organele viitorului făt încep să se formeze din masa celulară interioară.

Potențialul de implantare al embrionului crește într-o situație în care este identificată o cavitate mare de blastocist și masa celulară interioară și trofoblastul sunt bine dezvoltate. Introducerea blastocistului în țesutul endometrial al organului reproducător are loc de obicei în zilele 6-7 de dezvoltare embrionară.

Există mai multe clasificări ale blastocistelor care sunt similare între ele. Atunci când se determină calitatea unui blastocist, se pune accent pe următorii indicatori:

  • calitatea trofectodermului;
  • dimensiunea cavității;
  • calitatea masei intracelulare.

Această metodă de evaluare a embrionilor după aspect este pe deplin justificată, deoarece există o corelație între frecvența concepției cu succes și calitatea embrionilor transferați. De fapt, determinarea unui embrion de înaltă calitate este considerată o sarcină destul de dificilă, de care depinde ulterior rezultatul final.

Transferul unui embrion la organul reproducător


De obicei se practică plasarea embrionului în uter la 2-3 zile după cultivare. Alegerea momentului este determinată de intensitatea fragmentării embrionului. Practica medicală arată că în timpul procedurii FIV, cel mai bine este să transferați doar doi embrioni de înaltă calitate în cavitatea organului reproducător. Dacă calitatea lor ridică unele îndoieli, se recomandă transferul a trei embrioni deodată.

Unele centre medicale practică transferul a patru sau chiar cinci embrioni în organul reproducător deodată. Cu toate acestea, recent mulți experți au susținut că cea mai bună opțiune este plasarea a trei embrioni în uter. După această procedură, embrionii implantați prind rădăcini sau mor. Prin transferul mai multor embrioni în uter, cresc șansele unei sarcini multiple.

Implantarea embrionilor în cavitatea organului reproducător se realizează după decizii atent cântărite de către un specialist, ținând cont de calitatea și cantitatea acestora. Folosind clasificarea embrionilor, clinicile medicale identifică ovulul care se poate implanta cel mai bine în cavitatea uterină. Din aceasta se dezvoltă ulterior un embrion sănătos și cu drepturi depline. După finalizarea procedurii de implantare, începe procesul de creștere activă a embrionului în interiorul corpului mamei.